2020/2/28
自2020年以来,新型冠病毒(2019-nCoV)一直威胁着人们的健康,尽管它和SARS相似,但无疑的是这种病毒的传染性更强。现有的RT-qPCR检测方法对人员和设备要求较高,因此迫切需要找到一种快速、简便的检测方法。
iLACO可检测出低至10个拷贝的ORF1ab基因
![]()
https://doi.org/10.1101/2020.02.20.20025874
![]()
阳性组和阴性组在蓝光下呈现不同颜色
那么iLACO对新冠病毒的检测能力如何?为此,研究人员评估了沈阳2020年以来经过RT-QPCR初诊的43个样本,结果发现97.6%(42/43)经qPT-PCR验证的样品与2 µl样本孵育40分钟后显示出一致的信号,只有一个样本在50分钟后颜色保持不变,表明低剂量病毒会导致假阴性或自发性阴性信号。
RT-LAMP 63°C下温育30分钟可获最佳扩增结果
https://doi.org/10.1101/2020.02.19.20025155
进一步,研究人员对COVID-19、MERS、BtCoV以及MHV病毒进行了系统特异性测试,结果显示该系统仅对COVID-19的样本有反应,使用人体血清、尿液、唾液、口咽拭子和鼻咽拭子均可成功地完成RT-LAMP。
从左至右分别为血清、尿液、唾液、鼻咽拭子、口咽拭子的检测结果
此外,研究人员还将RT-LAMP引物的序列与SARS和与感冒相关的冠状病毒的序列进行了比对,结果发现这些冠状病毒与RT-LAMP引物存在27-54%的核苷酸不匹配,这表明它们不可能检测出RT-LAMP阳性结果。考虑到病毒可能发生突变,研究人员还检查了RT-LAMP引物是否与来自其他地点的27个不同COVID-19分离株存在不匹配现象,结果发现不匹配度为0。
尽管这项研究存在一些局限,比如COVID-19是生物安全级别,由于无法直接检测相关病毒而使用了来自这些病毒相同区域的核苷酸寡核苷酸,但是这些实验确实证明了该方法的可行性以及对COVID-19的特异性,对于潜在感染者的筛查和病毒检测具有很大的价值。
这两项研究旨在寻找到比RT-qPCR检测更加快速、准确且简单易上手的病毒检测方法,这些方法对于社区和普通人群检测是否感染病毒具有重要意义。
合肥知恩生物技术有限公司 版权所有 皖ICP备15022333号 免责声明