首先把Transwell倒置，在Transwell的PVPF膜（0.8µm）的下表面涂一层fibronectin(10 µg/mL，50µL)，37度2小时，PBS洗一遍后，放入预先每孔加有600µL的培养基（含10%血清）的24孔板内，后在Transwell的内室加入细胞（100µL，用含0.1%血清的培养基稀释好自己所需密度），放入培养箱，12-18小时后，取出Transwell，用棉签擦去PVPF膜靠近内室那一面的细胞，另一面的细胞用甲醛室温固定30分钟，结晶紫染色20分钟，用清水洗3遍以上，后在显微镜下观察细胞，记数。

四、内皮细胞HMEC-1迁移实验
1%明胶处理的Transwell经无血清的MCDB131培液于培养箱中平衡1小时后，上室加入100µL用serum-free MCDB131稀释的5×10⁴/孔的HMEC及不同浓度的药物，下室加入0.6mL serum-free的MCDB131培液及20%FCS刺激迁移，同时设置相应阴性及阳性对照，置于CO₂培养箱中作用8小时，然后弃去孔中培液，用90%酒精常温固定30分钟，0.1%结晶紫常温染色10分钟，清水漂净，用棉签轻轻擦掉上层未迁移细胞，显微镜下观察并拍照，最后用10%乙酸100µL/孔抽提10分钟，于600nm处测定OD值。抑制率计算公式为：抑制率（%）=[(OD值给药组-OD值无刺激阴性对照)/（OD值不加药阳性对照-OD值无刺激阴性对照)]×100%。