产品名称：大鼠PI3K/Akt信号通路基因检测试剂盒

货号：ZN-SP519

保存条件：避光，-20 ℃，保质期2年

注：本试剂盒仅适用于科学研究，不得用于临床

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PI3K/Akt Signal Pathway specific primers

自首次发现以来，丝氨酸/苏氨酸激酶 Akt（又称作蛋白激酶 B 或 PKB）作为一种原癌基因，已经成为医学界主要的关注热点，这是因为它在调控各种不同细胞功能（包括代谢、生长、增殖、存活、转录以及蛋白质合成）方面发挥重要作用。能够激活 Akt 信号级联放大的因子，包括受体酪氨酸激酶、整合素、B 细胞和 T 细胞受体、细胞因子受体、G 蛋白偶联受体，以及其他能够通过磷脂酰肌醇三激酶 (PI3K) 诱发三磷酸 (3,4,5)磷脂酰肌醇 (PIP3) 生成的刺激。这些脂质可作为具有普列克底物蛋白同源性(PH) 结构域的蛋白质膜的停泊位点，其中包括 Akt 及其上游激活剂 PDK1。膜上的 PDK1 在 AKt 的苏氨酸 308 位点将其磷酸化，导致 Akt 的部分激活。丝氨酸 473 位点被 mTORC2 磷酸化，可激发Akt 的完全的酶活性。PI3K 相关激酶 (PIKK) 家族成员，包括 DNA-PK，也同样能在 Akt 丝氨酸 473 位点将其磷酸化。Akt 可被蛋白磷酸酶 2A (PP2A) 以及 PH-结构域富含亮氨酸-重复-包含蛋白磷酸酶 (PHLPP1/2)去磷酸化。另外，抑癌基因磷酸酶和张力蛋白同源蛋白(PTEN)，也通过去磷酸化 PIP3 抑制 Akt 活性。

PI3K/Akt 信号通路失调见于多种人类疾病，包括癌症、糖尿病、心血管疾病和神经疾病。在癌症中，已发现两处可增强 PI3K 内在激酶活性的突变。另外，人类肿瘤中 PTEN 常发生突变或缺失。Akt 的活化突变也有报道。Akt 信号转导失调造成人类疾病的频率之高，导致 PI3K 和 Akt 的小分子抑制剂的积极开发达到顶峰。

存在三种高度关联的 Akt 亚型（Akt1、Akt2 和 Akt3），可以将含有共同磷酸化基序 RxRxxS/T 的底物磷酸化。Akt 各亚型可共享多种底物，但也已发现亚型特异性 Akt 底物。例如，所有 Akt 各亚型都能够将 PRAS40（ 分子量为 40 kDa 富含脯氨酸的 Akt底物）磷酸化，但只有 Akt1 能够磷酸化肌动蛋白相关的蛋白 palladin。

Akt 通过作用于 TSC1/TSC2 复合体以及 mTORC 信号转导，进而调节细胞生长。Akt 通过磷酸化 CDK 的抑制剂 p21 和 p27，进而影响细胞增殖。Akt 是细胞存活的主要调节因子，通过直接抑制促凋亡蛋白（如 Bad）或抑制由转录因子（如 FoxO）产生促凋亡信号实现调节。Akt 通过激活 AS160 和 PFKFB2，对调节代谢发挥重要作用。另外，已有证据显示，Akt 可调节参与神经功能的多种蛋白，包括 GABA 受体、ataxin-1 和 huntingtin 蛋白。Akt 通过磷酸化 palladin 和 vimentin，参与细胞迁移和侵袭。Akt 还可以通过磷酸化 IKKα 和 Tpl2，调节 NF-κB 信号转导。由于Akt/PKB 在调节各种细胞功能方面都扮演着重要角色，这使其成为人类疾病治疗的重要靶标。

信号通路基因检测试剂盒系列产品，是知恩生物开发的一套稳定、可靠、高效的用于基因表达量检测产品。大鼠PI3K/Akt信号通路基因检测试剂盒产品能够快速高效的对大鼠PI3K/Akt信号通路相关基因定量检测分析。与传统的检测分析方法相比，知恩生物信号通路基因检测试剂盒的优势在于：其包含全部经过验证的特异性引物、第一链cDNA合成及Real Time RT-PCR所需的各种酶、buffer等组分，使客户能够更加快捷，方便的进行相关基因表达量分析研究。

产品特色

1.自主设计验证的引物库

知恩生物拥有自主设计并实验验证的引物库，涵盖人、大鼠、小鼠、兔、猪等多个物种的数万个相关基因。包含经验证的引物设计，不仅极大的节省了宝贵的科研时间，而且使本试剂盒在大鼠PI3K/Akt信号通路相关基因定量检测分析时更加可靠、有效。

2.多重保障的可靠性

首先，知恩生物所使用引物参考序列来源可靠，主要来源为Ensembl及NCBI数据库，然后通过Meg Align分析比对后选取出保守的最佳扩增区域，最后是跨大内含子设计引物和gDNA Remover组分的引入，进一步提高了检测结果的可靠性。

3.令人惊叹的检测灵敏度及特异性

引物设计充分考虑多种影响扩增效率及特异性因素，不仅能同时适应高、低拷贝数，50copies模板时，熔解曲线峰图仍为特异性单一峰，反映了本试剂盒的高灵敏度及特异性。

4.特别优化的反应体系及条件

此外，知恩生物特别优化设计的基因检测试剂盒，还特别优化了第一链cDNA合成条件、QPCR反应体系等，使用优化的反应体系和条件能够更轻松的获得理想的检测分析结果。

实例展示

以下实验结果图，是对PI3K/Akt信号通路基因表达量检测分析后得到。

picture1：通过扩增曲线图可以看出，使用本试剂盒成功检测出PI3K/Akt信号通路的10个靶基因。
picture2：10对检测引物扩增产物的熔解曲线峰图均为特异性单峰。
picture3：大鼠PI3K/Akt信号通路中10个靶基因的QPCR产物的琼脂糖凝胶电泳图。图片显示各引物的扩增产物均为单一条带。

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